全自动生化分析仪的监测功能

各种自动生化分析仪都具有对测定过程的监测功能,以便提高检测的准确性。高档分析仪的监测功能更强。

1.试剂空白监测

每种试剂都有一定的空白吸光度范围,试剂空白吸光度的改变往往提示该试剂的变质:


如利用Trinder反应为原理的检测试剂会因酚被氧化为醌而变为红色,碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转移酶、淀粉酶等检测试剂会因基质分解出硝基酚或硝基苯胺而变黄,有些试剂久置后变浑浊。这些情况均可使空白吸光度升高。丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶等负反应,在放置过程中其试剂空白吸光度会因NADH自行氧化为NAD+而下降等等。

试剂空白的测定方法:

①每瓶试剂在使用前先检测其试剂空白吸光度。这种方式适用于先加样品后加试剂的分析仪。


②每个样品测定之初,均检测试剂空白吸光度,适用于先加试剂后加样品的分析仪。

2.试剂空白变化速率监测

一些酶试剂在反应温度下不稳定,其空白吸光度可随时间逐渐发生变化,这种变化的主要原因与工具酶或辅酶的纯度有关,且因试剂的组成和生产厂家的不同而不同。这种试剂的空白变化将会影响测定结果的准确性,通常导致检测结果偏高。如果设置此项监测,则分析仪在结果计算时会自动减去试剂空白变化速率。

3.样品信息监测

样品的溶血、脂浊、黄疸等会对测定结果产生非化学反应的干扰,根据溶血、脂浊、黄疸的光谱吸收特性,用双波长或多波长检测其性质和程度。一般是测定样品在600nm/570nm、700nm/660nm和505nm/480nm吸光度比值的大小来分别判断样品溶血、脂浊和黄疸程度。然后在结果计算时自动校正,以部分减少干扰程度。

4.结果可靠性监测

(1)终点监测:终点法测定要判断所选的测光点是否到达终点或平衡点。一些分析仪在所选终点后再选一个测光点,比较这两点吸光度的差异来判断反应是否到达终点。

(2)线性期监测:连续监测法选择时间-吸光度反应曲线上的线性期来计算酶活性或被测物浓度,因此,仪器要确定此连续监测期是否呈线性。

其监测方法为:

①将连续监测到的各吸光度值进行线性回归,计算出各点的方差,根据方差值的大小来判断是否呈线性;

②取连续监测期开始若干点的变化速率与连续监测期最后若干点的变化速率进行比较,来判断是否为线性期。

5.底物消耗的监测

在连续监测法、两点法测定酶活性时,如果监测期内吸光度上升或下降超过某一吸光度变化范围,则说明该样品酶活性非常高,底物已接近被耗尽,监测期的吸光度将偏离线性,使测定结果不可靠。此时不打印结果或打印结果同时也打印出底物耗尽提示,该样品应稀释一定倍数重新测定。此监测对于采用负反应分析酶活性的方法甚为重要。

6.方法线性范围监测

每种待测物都有一个可测定的浓度或活性范围,样品结果若超过此范围,分析仪将显示测定结果超过线性范围的提示,多数分析仪会自动将样品减量或增量重新测定。

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